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包膜氯化膽堿在人工體外模擬奶牛瘤胃、皺胃、小腸中溶出、釋放、吸收的效果評價

時間:2021-09-16 10:17:00 來源:http://www.itcgw.cn/ 點擊:

包膜氯化膽堿在人工體外模擬奶牛瘤胃、皺胃、小腸中溶出、釋放、吸收的效果評價

氯化膽堿屬于維生素類,其主要生理功能具有維持細胞結構完整性,保證細胞膜通透性和生物信號傳導等方面發揮關鍵作用。

 

膽堿也是構成磷脂的重要成分,參與骨骼和軟骨基質的成熟過程;參與動物體內脂肪代謝,脂肪在肝臟被降解成脂肪酸和甘油,膽堿可以將脂肪酸與卵磷脂結合后轉運出肝臟,避免脂肪在肝臟的大量沉積,可緩解脂肪肝的形成。

膽堿作為甲基供體參與蛋氨酸的合成,因而可節省體內蛋氨酸中甲基團的消耗,并在形成醋酸脂乙酸膽堿的情況下參與傳導神經沖動。

 

 

在奶牛特殊的的圍產期間,奶牛需要更多的膽堿來幫助肝臟處理多余的脂肪,讓甘油三酯能順利轉移出肝臟。

其意義在于減少肝臟脂肪的沉積和酮體的生成,能有效減少脂肪酸和酮體對組織和器官的損傷,使奶牛從泌乳期的開端到更高的峰值產奶量階段有一個平穩的過渡,緩解機體糖-脂代謝紊亂,減少多種代謝性疾病的發生,如脂肪肝、酮病、繼發性疾病等,間接提高奶牛壽命和牧場經濟效益。

 

 

目前市場上出售的氯化膽堿產品劑型主要有液體狀、粉狀和包膜狀。現主要針對包膜氯化膽堿在奶牛圍產期中的應用效果,設計包膜氯化膽堿人工體外模擬奶牛瘤胃、皺胃、小腸中的溶出、釋放、吸收分布情況的試驗。

 
1.試驗方案:取市售粉狀50%氯化膽堿(20210612)和50%包膜氯化膽堿(耀飛公司自產,20210628),分別進行人工體外模擬奶牛瘤胃溶出度、皺胃釋放率、小腸中的吸收分布情況。

 

2.試驗材料:50%氯化膽堿(硅型)、50%包膜氯化膽堿(奧特堿)、碳酸氫鈉、磷酸氫二鈉、氯化鈉、氯化鉀、氯化鎂、氯化鈣、氯化鉀、稀鹽酸溶液、氫氧化鈉溶液、甲基紅一亞甲基藍混合指示液、雷氏鹽甲醇溶液、磷酸氫二鉀、蛋白酶、胰脂肪酶、淀粉酶、玻璃砂芯坩堝、分析天平、電熱干燥箱、SHZ-82水浴恒溫振蕩器、超聲清洗器、電爐、真空泵、燒杯、滴定管、純化水等一般試驗室試劑和儀器。

甲基紅一次甲基藍混合指示液

 

3.試驗方法

3.1 瘤胃溶出率:準確稱取對照組粉劑氯化膽堿和試驗組包膜氯化膽堿各9份,每份2.5g,分別浸入50ml人工瘤胃液中(McDougall緩沖液),McDougall緩沖液:將7.43克碳酸氫鈉、7.00克磷酸二鈉12水合物、0.34克氯化鈉、0.43克氯化鉀、0.10克氯化鎂6水合物和0.05克氯化鈣溶解在1000毫升水。于39℃恒溫并搖晃2、4、6、8、10、12、16、20、24小時,分別分離過濾,測定濾液中膽堿含量與總量的比率。(過瘤胃保護率=100%-溶出率)

 

3.2 皺胃釋放率:準確稱取對照組粉劑氯化膽堿和試驗組包膜氯化膽堿各5份,每份2.5g,分別浸入50ml皺胃液相對的Clark-Lubs緩沖液中,Clark-Lubs緩沖液:將3.73克氯化鉀和2.1毫升鹽酸溶解在1000毫升水中而制成的溶液。然后于39℃恒溫搖晃2、4、6、8、10小時,分別分離過濾,測定濾液中膽堿含量與總量的比例。
 

3.3 小腸釋吸收率:準確稱取包膜膽堿5份各2.5g分別浸入小腸液相對的人工腸液(ph6.8)中,人工腸液:將6.8g磷酸氫二鉀溶解于500ml水中,加入0.25g胰蛋白酶、9.375g胰脂肪酶、83.3mg胰淀粉酶,并定容至1000ml,用0.1mol/L氫氧化鈉溶液調節ph為6.8。然后于39℃恒溫搖晃2、4、6、8、10小時后,分別過濾,測定濾液中膽堿含量與總量的比例。

 

3.4 氯化膽堿含量測定方法:精密量取續濾液10ml,置100ml高型燒杯中,加3ml氫氧化鈉溶液,蓋上表面皿,在電爐上加熱微沸5 min,冷卻,用水沖洗表面皿及燒杯壁。加1滴甲基紅一亞甲基藍混合指示液,用鹽酸溶液調至紫紅色(pH5-pH6),于冰水浴中冷卻至5℃以下,繼續保持在冰水浴中,在攪拌下,緩慢滴加15 ml雷氏鹽甲醇溶液,繼續攪拌反應30 min,再靜置陳化30 min。將沉淀轉移到預先已于(105士2)℃下干燥至質量恒定的玻璃砂芯坩堝中,減壓抽濾、用水洗滌沉淀3~4次,每次用水約10ml。將裝有沉淀的玻璃砂芯坩堝移人(105士2)℃電熱千燥箱內,干燥2h,取出。于干燥器內冷卻至室溫,稱量。在測定的同時,按測定相同的步驟,對不加實驗室樣品而使用相同數量的試劑溶液做空白試驗。結果計算:

 

W1-W0
X%=—————×5×0.33045×100
M×N

式中:
W1--- 沉淀質量的數值,單位為克(g);
W0--- 空白試驗沉淀質量的數值,單位為克(g);
M--- 試料質量的數值,單位為克(g);
0.33045---氯化膽堿摩爾質量與雷氏鹽-氯化膽堿沉淀產物摩爾質量的比值
5--試料的稀釋倍數
N---包膜氯化膽堿的標示含量

 

4.試驗結果及評價:



根據檢測結果,普通氯化膽堿在瘤胃液中已完全溶出,活性成分已降解,不能到皺胃、小腸部位。而經過嵌入式包被工藝的包膜氯化膽堿(奧特堿),在本試驗條件下的過瘤胃保護率大于90%、皺胃液中釋放率小于10%,在小腸部位的吸收率大于97%。從而確保足量膽堿的活性成分在腸道中充分吸收利用。

 

5.試驗小結:包膜氯化膽堿,可以減少脂肪肝,降低奶牛酮病的發生。促進NEFT的完全氧化,抑制酮體生成;降低血液中的β-羥基丁酸含量,從而減少甘油三酯沉積和脂肪肝,減少奶牛酮病發生。可以提高奶牛產奶品質,延長產奶高峰,促進NEFT轉化為ATP,發揮產能作用,抑制能量負平衡的影響,增加泌乳能力。還可以提高乳脂、乳蛋白,減少蛋氨酸轉化為膽堿的消耗,從而更多用于乳蛋白的合成。


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